鲑鱼降钙素串联基因的克隆、表达及重组蛋白的生物学活性

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目的:将鲑鱼降钙素(salmon calcitonin,sCT)基因以同向串联方式连接,构建串联多拷贝基因的表达质粒pHis-nCT(n≤3),并在原核中表达,研究表达产物的降钙活性.方法:采用半化学半酶促法合成sCT基因,利用基因的特点及特殊的酶切位点NdeI和SamI在表达载体pTrcHisC中进行sCT基因与载体基因的融合及sCT基因的串联,并在TOP10中表达串联多拷贝基因.表达产物形成包含体,对包含体变性、复性后,以Ni-Chelating Sepharose亲和纯化.用血清钙浓度测定法研究串联
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