【摘 要】
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目的 观察西达本胺(CDM)能否影响人慢性髓系白血病耐药株K562/ADM细胞对柔红霉素(DNR)的敏感性,并探讨其可能的分子机制.方法 体外常规培养K562细胞和K562/ADM细胞,给予不同
【机 构】
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郑州工业应用技术学院医学院医学机能教研室,河南新郑,451150;郑州工业应用技术学院临床基础教研室,河南新郑,451150;郑州大学护理学院基础教研室,郑州,450052
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目的 观察西达本胺(CDM)能否影响人慢性髓系白血病耐药株K562/ADM细胞对柔红霉素(DNR)的敏感性,并探讨其可能的分子机制.方法 体外常规培养K562细胞和K562/ADM细胞,给予不同剂量CDM和(或)DNR处理48 h后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测CDM与DNR对K562和K562/ADM细胞的毒性作用,采用Chou-Talalay中效分析法对两药的联合效应进行评价,采用流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和凋亡,采用Western blotting方法检测组蛋白2AX(H2AX)、γH2AX(Ser139)、共济失调毛细血管扩张征突变基因(ATM)、p-ATM(Ser1981)、乳腺癌易感蛋白1(BRCA1)和p-BRCA1(Ser1524)的蛋白表达水平.结果 DNR可剂量依赖性地抑制K562/ADM细胞活力(P＜0.05),半数抑制浓度(IC50)为11.76μmol/L,耐药倍数为18.09;CDM可协同增强DNR对K562/ADM细胞的抑制作用置信区间(CI)(CI＜1),反转倍数为8.11;与对照组相比,DNR组细胞增殖率显著降低(P＜0.05),G2/M期细胞比例和凋亡率明显升高(P＜0.05),而无毒剂量的CDM可协同增强DNR引起的细胞增殖抑制、G2/M期阻滞和细胞凋亡(P＜0.05);耐药株K562/ADM细胞中ATM和BRCA1蛋白表达水平显著高于其亲代K562细胞(P＜0.05);DNR可上调K562/ADM细胞中H2AX、ATM和BRCA1蛋白的磷酸化水平(P＜0.05);CDM与DNR联用可使γH2AX蛋白水平进一步升高,但p-ATM和p-BRCA1蛋白水平的变化则相反(P＜0.05).结论 CMD可反转K562/ADM细胞对DNR的耐药性,这可能与上调H2AX蛋白的磷酸化水平以及下调ATM和BRCA1蛋白的磷酸化水平有关.
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