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新金色分枝杆菌（Mycobacteriumneoaurum）能将植物甾醇转化为药物中间体4-烯-雄甾-3，17-二酮（AD）和1，4-二烯-雄甾-3，17-二酮（ADD），其中3-甾酮-△1-脱氢酶（KSDD）是AD转化为ADD的关键酶。本实验室在筛菌过程中筛选到-株能将甾醇转化为AD（D）的菌株，经鉴定为M．neoaurum，本研究以该菌株为出发菌株，首先扩增出长度约1．7kb编码KSDD的ksdD基因全序列，在基因内部插入-段来源于质粒pET28a的卡那霉素抗性基因（Km），将得到的基因元件ksdD：