【摘 要】
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目的:研究含凝血因子FXa识别位点的基因与表达载体pGEX-KG连接后在大肠杆菌中的表达.方法:用PCR对人工合成的抗菌肽X基因的5′端进行改造,引入FXa的酶切位点,用限制性内切酶
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目的:研究含凝血因子FXa识别位点的基因与表达载体pGEX-KG连接后在大肠杆菌中的表达.方法:用PCR对人工合成的抗菌肽X基因的5′端进行改造,引入FXa的酶切位点,用限制性内切酶作用后,连接到含Ptac启动子的表达载体pGEX-KG中,转化大肠杆菌DH5α,用原位杂交法筛选到阳性克隆.转化大肠杆菌BL21,用异丙基硫代βD半乳糖(IPTG)诱导.结果和结论:抗菌肽X基因在大肠杆菌中获高效表达,表达量约占细胞总蛋白的20%.重组蛋白以可溶形式存在.融合蛋白经FXa切割后,产物有抗菌活性.
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