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合成了对位取代的1-苯基-1，4-二氢烟酰胺和对位取代的1-苯基-1，2-二氢烟酰胺作为烟酰胺辅酶两种模型物，分别测定了它们与N-甲基吖啶正离子反应热和活化吉布斯自由能。通过对其热力学参数和动力学参数的比较发现，虽然1，2-二氢烟酰胺辅酶模型物与吖啶正离子反应热力学驱动力大于相应的1，4-二氢烟酰胺辅酶模型物与吖啶正离子反应热力学驱动力，但前者具有很高的活化熵，从而导致其活化吉布斯自由能反而大于后者。表明烟酰胺辅酶NADH反应中心结构在其氧化还原循环进化过程中选择1，4-二氢烟酰胺而不是1，2-二氢烟酰胺