发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核蛋白的原核表达与鉴定

来源 :郑州大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:njxgfd
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目的:构建发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒( SFTSV)核蛋白( NP)基因的原核表达载体,获得纯化并具有抗原性的重组表达蛋白。方法:提取病毒RNA,逆转录为cDNA后 PCR 扩增得到目的片段;通过连接pMD18-T构建克隆载体,测序正确后连接至原核表达载体pMAL-c2x中,转化大肠杆菌JM 109,IPTG诱导表达、纯化MBP-NP融合蛋白。采用SDS-PAGE、Western blot对融合蛋白进行分析;建立间接ELISA方法对SFTSV患者血清NP抗体进行检测。结果:成功构建了NP基因的原核表
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