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目的
观察小干扰RNA(siRNA)沉默c-myc基因的表达对人胰腺癌细胞株SW1990细胞生物学影响。
方法用siRNA沉默胰腺癌SW1990细胞中c-myc基因,用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot技术检测c-myc m RNA及蛋白的表达量;噻唑蓝(MTT)法检测siRNA沉默c-myc基因对SW1990细胞增殖的影响;膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双染流式细胞术检测沉默c-myc基因细胞凋亡水平;Transwell细胞迁移实验检测siRNA沉默c-myc基因对SW1990细胞迁移能力的影响。
结果靶向c-myc的特异性siRNA可以高效抑制人胰腺癌SW1990细胞c-myc基因表达,在m RNA水平(0. 263±0. 048)较转染对照质粒组(0. 970±0. 012)明显降低,c-myc蛋白质表达量及细胞增值率均较转染对照质粒组明显降低;转染后48 h c-myc siRNA组细胞凋亡率为(19. 90±2. 09)%,明显高于siRNA阴性对照组(4. 93±0. 25)%和空白对照组(4. 40±0. 34)%;Transwell实验结果示细胞穿膜数c-myc siRNA组[(34. 3±1. 2)个]较siRNANC组[(68. 3±5. 8)个]和空白组[(72. 3±1. 2)个]均明显降低。
结论c-myc siRNA能够显著抑制c-myc基因在人胰腺癌SW1990细胞中的表达,降低细胞的增殖和迁移能力,促进细胞的凋亡。