【摘 要】
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目的:研究孕激素对小鼠脾细胞淋球菌(Neisseria gonorrhoeae,Ng)感染模型中NLRP3炎性体表达及Th17/Treg分化的影响.方法:体外分离、培养小鼠脾细胞后,分为如下5组:空白对照组、Ng组、Ng+1×10-9 mol/L孕酮组、Ng+1×10-8 mol/L孕酮组、Ng+1×10-7 mol/L孕酮组.培养3d后收集细胞,采用流式细胞术检测Th17/Treg细胞比例,利用实时荧光定量PCR检测各组细胞NLRP3、Th17/Treg特异性转录因子RORγt、Foxp3 mRNA表达
【机 构】
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武汉市第一医院皮肤科,湖北武汉430022
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目的:研究孕激素对小鼠脾细胞淋球菌(Neisseria gonorrhoeae,Ng)感染模型中NLRP3炎性体表达及Th17/Treg分化的影响.方法:体外分离、培养小鼠脾细胞后,分为如下5组:空白对照组、Ng组、Ng+1×10-9 mol/L孕酮组、Ng+1×10-8 mol/L孕酮组、Ng+1×10-7 mol/L孕酮组.培养3d后收集细胞,采用流式细胞术检测Th17/Treg细胞比例,利用实时荧光定量PCR检测各组细胞NLRP3、Th17/Treg特异性转录因子RORγt、Foxp3 mRNA表达水平,Western blot检测各组细胞NLRP3、Caspase-1p20、RORγt、Foxp3蛋白表达.ELISA法检测脾细胞培养上清中白细胞介素(interleukin,IL)-1β及Th17/Treg相关细胞因子IL-17、转化生长因子(transforming growth facfor,TGF)-β、IL-10水平.结果:脾细胞在淋球菌的刺激下,Th17细胞和Treg细胞比例增多,细胞内NLRP3、Th17/Treg特异性转录因子RORγt、Foxp3 mRNA和蛋白表达水平升高,Caspase-1p20蛋白表达水平升高,细胞培养上清中IL-1β、IL-17、TGF-β、IL-10含量增高(P＜0.01);加入孕酮预处理后,随着孕酮作用浓度的增高,Th17细胞比例、细胞内NLRP3和RORγt的mRNA和蛋白表达水平、Caspase-1p20蛋白表达水平、细胞培养上清中IL-1β和IL-17含量均明显降低,Treg细胞比例、细胞内Foxp3 mRNA和蛋白表达、细胞培养上清中TGF-β和IL-10含量均明显增高,与Ng组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:孕激素可抑制Ng感染诱导的小鼠脾细胞NLRP3表达及Th17细胞分化,促进Ng感染诱导的Treg细胞分化.
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