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目的建立一种测定人血浆中百草枯浓度的高效液相色谱法,并用于临床百草枯中毒患者的血浆药物浓度测定。方法血浆样品用WCX固相萃取柱预处理,反相高效液相色谱法进样测定。色谱柱:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:0.1 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲溶液(含80 mmol·L-1庚烷磺酸钠,磷酸调pH=3.0)-乙腈=80∶20,流速:1.0 mL·min-1,检测波长:258 nm,柱温:25℃。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率和稳定性。结果百草枯血浆浓度在205000 ng·mL-1内线性关系良好(r=0.999 9),定量下限为20 ng·mL-1,提取回收率为97.66%99.11%,方法回收率为90.06%104.50%,日内和日间精密度的RSD值均<4.00%,4℃放置8 h、反复冻融3次和低温冷冻21 d稳定性良好。测定临床血浆样本并计算百草枯中毒严重指数(SIPP),可辅助百草枯中毒患者的临床治疗并预测预后。结论该方法检测速度快,准确度、灵敏度高,可用于临床百草枯中毒患者血浆样品的检测,准确预测治疗的预后效果。