【摘 要】
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目的是建立一种简化、实用的用质粒DNA转化大肠杆菌的操作方法。采用氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞。以质粒pUC18,pCSN44,pAN52-1Not,pETts,pANth和植物双元表达载体pCAMBI
【机 构】
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西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室植物生物技术研究室西北大学生命科学学院
【基金项目】
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西安市科技局科技攻关项目(GG06078)
论文部分内容阅读
目的是建立一种简化、实用的用质粒DNA转化大肠杆菌的操作方法。采用氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞。以质粒pUC18,pCSN44,pAN52-1Not,pETts,pANth和植物双元表达载体pCAMBIA1301分别转化用于质粒扩增与保存的常用大肠杆菌菌株Top10和DH5α以及用于原核表达的常用大肠杆菌菌株BL21(DE3)和TB1。质粒与感受态细胞的混合液置冰上作用一定时间后,直接涂布含有筛选抗生素的LB平板,于37℃培养12～16h。结果表明,用不同大小的质粒DNA转化不同的大肠杆菌菌株,都可以获
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