探讨抑制miR-106b过表达对人脑胶质瘤细胞株增殖和侵袭的影响。
方法培养人脑U251、LN229及TJ905胶质瘤细胞,并将其分为细胞对照组,转染阴性对照组(简称阴性对照组),转染miR-106b inhibitors组(简称106b inh组)。将反义miR-106b用脂质体转染于人脑胶质瘤细胞中,抑制miR-106b的表达。采用实时定量PCR法检测转染后胶质瘤细胞miR-106b的表达,流式细胞术检测细胞周期的变化、噻唑兰比色分析法检测细胞增殖能力、软琼脂克隆形成实验评价细胞非锚定依赖性生长能力及Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化。
结果与细胞对照组,阴性对照组比较,(1)106b inh组3种胶质瘤细胞中miR-106b的表达均被明显抑制;细胞周期进展被抑制,S期细胞比例减少,G0/G1期细胞比例增加,其中U251、TJ905细胞的周期时相分布差异有统计学意义(P值均<0.05),LN229细胞的周期时相分布差异无统计学意义;(2)106b inh组转染抑制后48 h,3种胶质瘤细胞的增殖能力均明显减弱,P< 0.05;(3)细胞的克隆形成能力也被明显抑制[克隆形成率分别为,U251:(10.6 ± 0.9)%、(10.5 ± 1.2)%对比(3.3 ± 0.4)%;LN229:(12.5 ± 1.7)%、(11.0 ± 2.4)%对比(4.1 ± 0.3)%;TJ905:(9.9 ± 1.2)%、(10.2 ± 0.6)%对比(3.5 ± 0.4)%。P值均 < 0.01];(4)穿过Transwell小室的细胞数明显降低[U251:(90.6 ± 5.7)、(85.2 ± 6.1)个对比(27.6 ± 4.0)个;LN229:(22.6 ± 3.7)、(21.2 ± 3.7)个对比(2.4 ± 1.5)个;TJ905:(79.4 ± 4.4)、(76.8 ± 5.9 )个对比(11.8 ± 3.2)个。P值均 < 0.01]。
结论下调miR-106b的表达可抑制胶质瘤细胞的增殖、生长和侵袭能力。