【摘 要】
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比较了辣根过氧化酶（HRP）的三种还原底物,邻苯二胺（O-PD）、2,2′-连氮-双〔3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸盐〕（ABTS）及3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（TMB）的动力学,发现（1）不论以游离 HRP、HRP-I
【机 构】
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上海第一医学院生物化学教研室,上海第一医学院生物化学教研室,上海第一医学院生物化学教研室,
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比较了辣根过氧化酶（HRP）的三种还原底物,邻苯二胺（O-PD）、2,2′-连氮-双〔3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸盐〕（ABTS）及3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（TMB）的动力学,发现（1）不论以游离 HRP、HRP-IgG 或 HEP-Fab′为酶制剂,其 Km 均以 TMB 为最小;（2）TMB 所需的 H2O2最适浓度最低;（3）以 TMB 为底物时,酶活力受 pH 的影响最小;（4）酶活力测定的灵敏度最高;（5）蓝色的氧化产物可用于酶标定位,而加酸停止反应后的黄色产物又可用于酶标免疫测定的定量比色。再加上三种化合物中,仅 TMB 为非致癌性,故 TMB 是一个比较理想的 ELISA 的 HRP 底物。
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