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为建立一种快速高通量的荷斯坦牛瓜氨酸血症（Citrullinemia，CN）分子检测方法，依据CN是由于精氨酸琥珀酸（ASS）合成酶基因编码第86位精氨酸的密码子突变为终止密码子的遗传学基础，利用AssayDesignSW软件设计了1对引物和1条测序引物对三种不同基因型的基因材料进行测序分析。用建立的方法对55份进境荷斯坦牛血样进行检测，发现有1例为隐性基因携带者，将PCR产物进行常规测序，结果与焦磷酸测序检测结果一致。研究表明该方法可用于荷斯坦牛瓜氨酸血症的检测，是一种有效的新方法。