【摘 要】
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为探究草鱼Ⅲ型呼肠孤病毒VP6和VP38蛋白的生物学功能，利用酵母双杂交Gal4系统分别筛选了能与GCRV104毒株编码的 VP6和VP38相互作用的宿主蛋白。利用RT-PCR从感染GCRV104的草
【机 构】
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上海海洋大学国家水生动物病原库,上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(31672690);国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-46-12)
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为探究草鱼Ⅲ型呼肠孤病毒VP6和VP38蛋白的生物学功能，利用酵母双杂交Gal4系统分别筛选了能与GCRV104毒株编码的 VP6和VP38相互作用的宿主蛋白。利用RT-PCR从感染GCRV104的草鱼肾脏细胞中扩增GCRV104 s8和s10基因组片段的编码基因后，通过酶切与连接分别克隆至载体pGBKT7中，构建诱饵质粒pGBKT7-VP6和pGBKT7-VP38。对这些重组质粒进行细胞毒性和自激活检测后，分别以VP6和VP38为诱饵在草鱼酵母文库中筛选与其相互作用的宿主蛋白，对筛选得到的阳性酵母菌落进
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