【摘 要】
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目的:建立并验证陇中损伤散提取物(extract of Longzhong sunshang powder,LSE)对成骨细胞增殖影响的血清药理学研究方法。方法:用LSE末次给药后颈总动脉采血制备含药血清,按
【机 构】
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湖北医药学院附属人民医院骨科,湖北医药学院基础医学院药理教研室,甘肃省中医院
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目的:建立并验证陇中损伤散提取物(extract of Longzhong sunshang powder,LSE)对成骨细胞增殖影响的血清药理学研究方法。方法:用LSE末次给药后颈总动脉采血制备含药血清,按照LSE不同给药剂量、给药时间、采血时间分组,分别用含不同浓度LSE的血清培养胎鼠成骨细胞(osteoblast,OB)。采用MTT法检测细胞增殖能力,倒置相差显微镜观察OB形态,Von kossa染色法观察OB的矿化结节,以碱性磷酸酶活性、矿化结节数、基质钙含量、Ⅰ型胶原免疫组化等指标与空白对照组进行对比分析。结果:等剂量组(给药剂量),5 d组(给药时间),1h组(采血时间)的OD值,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);不同浓度含药血清组的OD值:10%组>15%组>5%组,组间比较有显著性差异(P<0.05);LSE可显著增加OB的碱性磷酸酶染色阳性细胞数、矿化结节数、基质钙含量(P<0.01)以及上调Ⅰ型胶原表达(P<0.05)。结论:LSE以等剂量(1 g/kg)灌胃给药5 d,末次给药1h后采血制备血清,以10%浓度与OB细胞共培养,是促进胎鼠成骨细胞增殖的优选方案。
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