【摘 要】
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利用高通量转录组测序技术探讨三黄汤(Sanhuang Decoction,SHD)治疗白念珠菌(Candida albicans,Ca)定植小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制.采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)联合Ca灌胃方式构建Ca定植下DSS诱导的小鼠UC模型,并予以SHD灌肠治疗;观察小鼠一般状态、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度和结肠黏膜损伤指数(colon mucosa da
【机 构】
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安徽中医药大学中西医结合学院/生命科学学院,安徽合肥230012;安徽省中医药科学院中西医结合研究所,安徽合肥230012;安徽中医药大学中药饮片制造新技术安徽省重点实验室,安徽合肥230012;安徽
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利用高通量转录组测序技术探讨三黄汤(Sanhuang Decoction,SHD)治疗白念珠菌(Candida albicans,Ca)定植小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制.采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)联合Ca灌胃方式构建Ca定植下DSS诱导的小鼠UC模型,并予以SHD灌肠治疗;观察小鼠一般状态、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度和结肠黏膜损伤指数(colon mucosa damage index,CMDI)变化;HE染色法进行组织病理学分析;平板培养法检测小鼠肠道Ca载荷;ELISA法检测小鼠血清抗酿酒酵母抗体(anti-saccharomces cerevisiae antibody,ASCA)和β-1,3-葡聚糖的含量,以及血清和肠组织TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平;高通量转录组测序技术分析对照组、模型组和三黄汤组的差异表达基因,并对差异表达基因进行GO和KEGG pathway富集分析;qRT-PCR和Western blot检测差异基因显著富集的NOD样信号通路相关基因NL-RP3、ASC、caspase-1和IL-1β的表达水平.结果 显示,SHD灌肠治疗可改善UC小鼠的一般状态,降低DAI评分;SHD能减少肠道Ca载荷,减轻肠道充血、糜烂和结肠缩短程度,并且降低血清β-1,3-葡聚糖含量,下调血清和肠道组织TNF-α、IL-1β和IL-6水平;SHD组vs模型组有383个差异表达基因,显著富集于免疫系统过程、细菌防御反应和固有免疫反应等生物学过程,KEGG pathway分析提示差异基因显著富集于NOD样受体信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用和视黄醇代谢等信号通路;SHD下调UC小鼠结肠组织NLRP3、caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白表达水平.以上结果表明,SHD可缓解Ca定植的小鼠UC,其作用机制可能与其对NOD样受体信号通路调控有关.
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