目的 研究NADPH氧化酶（NOX）是否参与瘦素诱导肝星状细胞（HSC）产生活性氧（ROS）,并探讨其机制. 方法取对数生长期的HSC-T6细胞,随机分为9组：瘦素组、瘦素＋ROS生成系统抑制剂[包括氯化二亚苯基碘嗡（DPI）、鱼藤酮、甲双吡丙酮、别嘌呤醇和吲哚美辛]组成的干预组、瘦素＋JAK抑制剂AG490组成的干预组、正常对照组和阴性对照组.HSC-T6细胞经药物作用1、12、24 h后,荧光显微镜和（或）流式细胞术观察细胞内二氯荧光素强度来反应ROS水平;分光光度计检测NADPH的吸光度,以NADPH的消耗量表示NOX活性;逆转录聚合酶链反应检测Rac1和p22Phox的mRNA相对表达量.数据分析用单因素方差分析、SNK-q检验或秩和检验,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 HSC-T6细胞加入瘦素（100 ng/ml）作用1 h后,荧光强度较正常对照组明显升高（92.91±4.19比27.56±6.27,P＜0.01）;DPI（20 μmol/L）和AG490（50 μ mol/L）能抑制ROS的产生,荧光强度值分别为37.35±4.66和53.12±6.63,均低于瘦素组的92.91±4.19（q值分别为31.78和22.76,P值均＜0.01）.瘦素作用HSC-T6细胞1 h后,NADPH的消耗量较正常对照组明显升高[（1.90±0.22）pmol·min-1·mg1比（0.76±0.06）pmol·min-1·mg-1,P＜0.05）],而作用12、24 h后的消耗量明显高于1 h时的消耗量（x2值均为7.54,P值均＜0.05）;DPI及AG490干预能抑制瘦素诱导NOX活性的上调（q值分别为16.58和16.23,P值均＜0.05）.瘦素作用12 h后,HSC-T6细胞内Racl和p22Phox的mRNA相对表达量明显高于正常对照组（分别为0.41±0.13比0.14±0.08和0.45±0.12比0.20±0.08,P值均＜0.05）.结论 瘦素诱导HSC产生的ROS主要来源于NOX,其机制可能是瘦素通过JAK信号通路直接激活NOX,并通过上调NOX的亚基表达使NOX活性持续增高而产生大量ROS。
NADPH氧化酶在瘦素诱导肝星状细胞株HSC—T6产生活性氧中的作用及其机制
【摘 要】
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目的 研究NADPH氧化酶（NOX）是否参与瘦素诱导肝星状细胞（HSC）产生活性氧（ROS）,并探讨其机制. 方法取对数生长期的HSC-T6细胞,随机分为9组：瘦素组、瘦素＋ROS生成系统抑制剂[包括氯化二亚苯基碘嗡（DPI）、鱼藤酮、甲双吡丙酮、别嘌呤醇和吲哚美辛]组成的干预组、瘦素＋JAK抑制剂AG490组成的干预组、正常对照组和阴性对照组.HSC-T6细胞经药物作用1、12、24 h后,荧光
【机 构】
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南昌大学第一附属医院消化内科,330006,南昌大学第一附属医院消化内科,330006,南昌大学第一附属医院消化内科,330006,南昌大学第一附属医院消化内科,330006,南昌大学第一附属医院消化
【出 处】
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中华肝脏病杂志
【发表日期】
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2010年18期
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