枸杞多糖对H2O2诱导人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的保护作用

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目的探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)对H2O2诱导人晶状体上皮细胞(SRA01/04)氧化应激损伤的保护作用。方法将SRA01/04细胞传代培养24 h后,加入不同浓度(50 mg·L-1、100 mg·L-1、200 mg·L-1、400 mg·L-1、800 mg·L-1和1600 mg·L-1)LBP预处理24 h,之后加入200μmol·L-1H2O2继续培养24 h,用CCK-8检测LBP对H2O2诱导的SRA01/04细胞活力的影响并筛选出LBP最佳保护浓度用于后续实验。采用流式细胞仪检测SRA01/04细胞凋亡率和线粒体膜电位变化情况,Western blot检测各组凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达情况。结果 CCK-8检测结果显示:LBP浓度为200 mg·L-1和400 mg·L-1时,能够促进SRA01/04细胞增殖,细胞存活率分别为(121.10±5.56)%和(128.20±3.79)%,与对照组(99.98±4.73)%比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H2O2模型组SRA01/04细胞经氧化应激损伤后,细胞存活率(51.67±4.91)%明显降低,与对照组(99.67±2.52)%相比,差异有统计学意义(P<0.001)。用200 mg·L-1和400mg·L-1LBP预处理后,SRA01/04细胞存活率明显提高至(74.01±3.21)%及(84.67±4.33)%,与H2O2模型组比较差异均有统计学意义(均为P<0.01)。400 mg·L-1LBP对RA01/04细胞氧化应激损伤保护作用最大。流式细胞仪检测结果显示:对照组细胞凋亡率为(5.1±1.2)%;H2O2模型组细胞凋亡率为(25.9±1.5)%;400 mg·L-1LBP预处理后,细胞凋亡率降至(13.8±1.2)%,与H2O2模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。线粒体膜电位检测结果显示:对照组阳性细胞数最多,线粒体膜电位高;H2O2模型组阳性细胞数最少,线粒体膜电位低;400 mg·L-1LBP预处理后,阳性细胞数增多及线粒体膜电位升高,与H2O2模型组相比,差异有统计学意义(P<0.001)。Western blot检测显示:与对照组相比,H2O2模型组Bcl-2表达下降,Bax表达上升(P<0.01);经400 mg·L-1LBP预处理后,Bcl-2表达上升,Bax表达下降,与H2O2模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 LBP对H2O2诱导人晶状体上皮细胞的氧化应激损伤具有保护作用,可抑制细胞凋亡。
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