IBDV VP2与Gallus Akirin2真核双表达载体的构建及应用

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tony_yang123
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为提高传染性法氏囊病(IBD)VP2DNA疫苗的免疫效力,将优化合成的IBDV VP2与Gallus Akirin2串联基因定向克隆至真核表达载体pTriEx-4,获得重组质粒pVP2-Akirin2。体外转染293T细胞,提取表达产物进行SDSPAGE和Western blot分析,结果显示:在58 000和35 000附近各有一蛋白条带,分别能与鸡IBD阳性血清和兔Akirin2多克隆抗体发生特异性反应。将pVP2-Akirin2与同期构建的pVP2对照质粒分别免疫SPF鸡,加强免疫2周后,攻IBDV BC6-85强毒,4d后统计保护率,并监测免疫过程中血清IBD抗体滴度和IBDV中和抗体滴度的动态变化,结果显示:SPF鸡二免后14d,pVP2-Akirin2组血清IBD抗体滴度和IBDV中和抗体滴度均极显著高于pVP2组(P<0.01),且对IBDV强毒株BC6-85攻击的保护率为75%,高于pVP2对照组(55%)。结果表明:Gallus Akirin2基因对IBD VP2DNA疫苗具有明显的免疫增强作用。
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