靶向 RECQL4基因的 shRNA 慢病毒表达载体的构建及鉴定

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目的:构建介导 RECQL4 RNA 干扰的 shRNA 慢病毒表达载体。方法将人工合成的 RECQL4 siR-NA 经 PCR 扩增后与线化的 pLKO.1慢病毒表达载体连接,经测序鉴定后,将 pLKO.1-RECQL4-shRNA 与慢病毒包装质粒共转染入 HEK -293T 细胞,产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度。体外感染人结肠癌细胞 RKO 后,实时定量 PCR 和 Western blot 检测 RECQL4 mRNA 和蛋白的沉默效果。设置未加入任何慢病毒表达载体的 RKO 细胞为未感染组,感染
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