利用Tet-on系统构建调控APP（swe）基因表达的SH-SY5Y细胞模型

来源 :广东医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：walker1234

【摘要】

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目的利用Tet-On诱导可调控系统构建表达淀粉样前体蛋白突变基因（APPswe）细胞模型。方法构建重组质粒p TRE-APPswe-Flag,利用慢病毒将其包装转染SH-SY5Y细胞。Puromycin筛选72 h

【作者】

：

杨振国张悠然廖壮槟李强黄洪新张晶晶

【机构】

：

广东医学院附属医院

【出处】

：

广东医学院学报

【发表日期】

：

2015年4期

【关键词】

：

APPswe Tet-On系统 SH-SY5Y细胞慢病毒 APPswe Tet-On system SH-SY5Y cells lentivirus

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（N0.31370824）, 广东医学院附属医院青年基金（N0.QK1307）, 广东省高等学校人才引进专项基金项目（N0.粤财教[2012]328号）

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目的利用Tet-On诱导可调控系统构建表达淀粉样前体蛋白突变基因（APPswe）细胞模型。方法构建重组质粒p TRE-APPswe-Flag,利用慢病毒将其包装转染SH-SY5Y细胞。Puromycin筛选72 h后,通过强力霉素诱导,Western blot检测验证,免疫荧光检测APPswe表达情况。结果强力霉素诱导后,筛选的细胞Western blot检测Flag标签蛋白表达明显,免疫荧光显示APPswe蛋白表达增加;撤掉强力霉素后,APPswe蛋白表达减少。结论成功构建了可调控Tet-OnAPPsw

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