肾小管损伤时内皮素1、肿瘤坏死因子α的表达及其对离体肾间质成纤维细胞的影响

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目的 研究内皮素1(ET1)、肿瘤坏死因子(TNFα) 在肾小管上皮细胞的表达、肾小管的损伤及它们对肾间质成纤维细胞的影响。方法 应用肾小管上皮细胞及肾间质成纤维细胞的体外培养;建立肾小管损伤动物模型;应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR) 、免疫组化SP法染色、放射免疫测定(RIA) 及双重免疫组织化学染色技术,并测定3HTDR 掺入率。结果 肾小管上皮细胞既有ET1mRNA和TNFαmRNA 的表达(RTPCR的扩增片段分别为546 bp 和415 bp) ,还有ET1 及TNFα的蛋白合成及分泌;细胞培养上清中ET1 和TNFα含量分别为1.42 pg/ml 和0 .58 ng/ml;且肾小管损伤及再生过程中,ET1 及TNFα表达增加。对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞分别加入ET1 、TNFα,3HTDR掺入率较对照组明显增高( P< 0.05);并证明肾间质成纤维细胞有ET受体(ETR) mRNA及TNF受体(TNFR1) mRNA的表达(RTPCR 扩增片段分别为544 bp 和347 bp)。结论 损伤及再生的肾小管上皮细胞较正常时合成和分泌更多的ET1 和TNFα,ET1 及TNFα分别
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