高GC hTwist融合蛋白载体构建及其表达条件优化

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liubin121366

【摘要】

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目的构建高GC基因Twist融合蛋白表达载体;高效表达并纯化GST/TWIST融合蛋白,为GST-Pulldown等实验做准备。从而进一步研究其生物学功能。方法以胃癌细胞系SGM7901 cDNA为模板

【作者】

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王利利刘彩红朱亚勤

【机构】

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教育部医学细胞生物学重点实验室

【出处】

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中国医科大学学报

【发表日期】

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2012年3期

【关键词】

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高GC hTwist 克隆融合蛋白原核表达 GC-rich hTwist cloning recombinant protein prokaryotic e

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目的构建高GC基因Twist融合蛋白表达载体;高效表达并纯化GST/TWIST融合蛋白,为GST-Pulldown等实验做准备。从而进一步研究其生物学功能。方法以胃癌细胞系SGM7901 cDNA为模板,依据高GC含量基因Twist分子结构特点和高GC含量基因引物设计策略,合成PCR引物。本实验通过分析各种DNA聚合酶不同扩增效率及特异性,选择适合高GC基因扩增的DNA聚合酶,优化反应体系的离子强度,并且结合改良降落PCR等综合策略的实施,比较不同策略下高GC含量基因Twist PCR产物的特异性及效率,

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