ITIH4基因重组慢病毒干扰系统的构建

来源 :中国癌症防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hahahuang
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目的构建ITIH4基因重组慢病毒干扰系统。方法选取干扰效果最佳的siRNA片段,设计shRNA结构,退火反应形成双链后采用T4DNA连结酶与线性化慢病毒载体Psico连接,转化大肠杆菌后提取质粒,并经质粒DNA测序和PCR鉴定重组质粒构建是否成功,转染293T细胞并测定培养上液的病毒滴度。结果测序结果显示,重组慢病毒干扰载体Psico/ITIH4测序结果与设计的shRNA序列完全一致,转染293T细胞后,其病毒滴度为9.5×10^3 IU/mL。结论成功地构建了ITIH4基因的重组慢病毒系统,为
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