基于人DAF框架的酵母展示肽库的构建与鉴定

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以hDAF cDNA为模板,用随机引物分别通过大引物PCR和交叠PCR方法引入突变,酶切后克隆到酵母表面展示载体pYD1,构建DAF-pYD1重组质粒,转化酵母细胞,PCR鉴定随机性,流式细胞仪分析DAF的表达.结果表明,随机性达到理论要求,通过流式细胞仪检测到酵母细胞表面有DAF分子的表达.以上结果表明,成功构建了基于DAF框架的酵母表面展示肽库,为进一步筛选DAF的突变体库奠定了基础.
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