【摘 要】
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为了在低成本的情况下,得到高浓度、高纯度的环形泰勒虫表面重组抗原的融合蛋白,设定表达过程中不同的OD600 nm、IPTG浓度与诱导时间,探索最佳表达条件.通过KCl染色法切胶后
【机 构】
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新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆农业大学动物医学学院,新疆维吾尔自治区动物卫生监督所
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为了在低成本的情况下,得到高浓度、高纯度的环形泰勒虫表面重组抗原的融合蛋白,设定表达过程中不同的OD600 nm、IPTG浓度与诱导时间,探索最佳表达条件.通过KCl染色法切胶后分别经透析袋电洗脱法与快速离心法回收目的蛋白.对上述试验的蛋白样品进行SDS-PAGE和Western blot检测.结果表明,在OD600 nm=1时加入浓度为1 mmol/L IPTG,过夜诱导时,重组蛋白的表达量最大.在KCl染色法切胶回收目的条带的基础上,电洗脱法与快速离心法均能得到同等浓度的高纯度目的蛋白,经Western blot检测重组蛋白的生物活性没有改变,仍具有良好的反应原性.
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