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目的：采用无血清培养法从人骨肉瘤细胞株U2-OS中分离肿瘤干细胞,检测肿瘤干细胞特异性标志物Stro-1的表达。方法：实验于2006-02/2007-02在兰州大学第二医院骨科研究所完成。①实验材料：人骨肉瘤细胞株U2-OS由中国科学院细胞库提供;DMEM/F12（1∶1）培养基（Gibco公司）;胎牛血清（杭州四季青公司）;PCR引物由上海生物工程公司合成。②实验方法：取原代培养的骨肉瘤细胞经胰蛋白酶消化制备单细胞悬液,用含表皮生长因子20μg/L、碱性成纤维细胞生长因子20μg/L、L-谷氨酰胺2mm