Pyrococcus furiosus小分子热休克蛋白Pfu-sHSP的克隆表达和纯化

来源 :信阳师范学院学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hyper11
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用PCR扩增嗜高温菌Pyrococcus furiosus的小分子热休克蛋白基因后,克隆于质粒p17473中.该小分子热休克蛋白Pfu-sHSP含有较多的稀有密码子,在大肠杆菌BL21(DE),几乎无表达,而在带有大肠杆菌稀有密码子AGA(arg)AGG(arg),AUA(ile)和CUA(1eu)的BL21--Codonplus(BE)3-RIL中能大量表达.大量表达Pfu-sHSP蛋白的细胞用超声波破碎后,离心沉淀用85℃水浴20min,再离心,上清液再以Q Sepha—rose Fast Flow阴
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