【摘 要】
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在植物及低等动物线虫中,引入外源性双链RNA（dsRNA）会导致细胞中同源mRNA降解,从而干扰其内源基因的表达,这可能是有机体防范病毒或转座子诱导DNA突变的一种生理机制,称为RNA干
【机 构】
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中国科学院昆明动物研究所; 中国科学院昆明动物研究所 昆明 650223; 昆明 650223; 昆明 650223;
【基金项目】
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国家重大基础研究资助项目（批准号:G2000016108）;中国科学院重大项目（批准号:KSCX1-05-02）
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在植物及低等动物线虫中,引入外源性双链RNA（dsRNA）会导致细胞中同源mRNA降解,从而干扰其内源基因的表达,这可能是有机体防范病毒或转座子诱导DNA突变的一种生理机制,称为RNA干涉（RNA interference,RNAi）.利用RNAi研究basonuclin基因在卵母细胞发生过程中的功能.将basonuclin特异的dsRNA导入小鼠生发泡期卵母细胞,可有效降低其mRNA的丰度,这种降解作用与dsRNA的浓度及作用时间成正比,但不影响非同源基因的表达,证明basonuclin dsRNA能特异识别、降解其内源基因的转录产物.免疫组化实验显示,dsRNA能降低卵母细胞中basonuclin蛋白的水平,但其效率不如RNAi对tPA及cMos基因活性的抑制,这可能是由于basonuclin蛋白的半衰期较长,而生发泡期卵母细胞在体外存活时间较短.结果表明,dsRNA能阻抑卵母细胞中同源基因的表达,其作用相当于基因敲除.质粒表达的发夹环型dsRNA也可以有效降解basonuclin转录产物,这为研究basonuclin在卵母细胞发育早期的功能提供了新的手段.
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