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【摘要】 目的 观察灵芝三萜类化合物(GLT)对自然衰老大鼠的抗衰老的作用。方法 以12只健康青年SD大鼠为正常对照组,60只自然衰老大鼠随机分为衰老模型组、GLT低、高剂量、溶媒组、阳性药对照共5组,灌胃给药后,检测大鼠脑组织一氧化氮(NO)含量以及一氧化氮合酶(NOS),血清总抗氧化能力(T-AOC)和单胺氧化酶(MAO)的活力。结果 与正常对照组相比,衰老模型组大鼠脑组织中NO含量降低,NOS活力降低,血清T-AOC活性降低,MAO活力升高;与衰老模型组相比,GLT组大鼠脑组织中NO含量升高、NOS活力升高,血清中T-AOC活性升高、MAO活力降低。结论 GLT可以有效地调节自然衰老大鼠体内的氧化水平,延缓衰老进程。
【关键词】 灵芝三萜类化合物;抗衰老;大鼠
文章编号:1004-7484(2013)-10-5961-01
灵芝Ganoderma lucidum Karst为多孔科真菌灵芝及紫芝等的子实体。又名赤芝(《本经》)、灵芝草(《滇南本草》),木灵芝(《杭州药用植物志》)。习惯所称灵芝属中赤芝的子实体部分,其主要成分之一是灵芝三萜类化合物(GLT)[1]。具有抗肿瘤、保肝解毒、降血压、降血脂、改善微循环、抗衰老、抗神经衰弱及治疗糖尿病等作用。
1 资料和方法
1.1 实验材料 SD大鼠:雌雄均有,24月龄及5月龄,由贵阳医学院实验动物中心提供,合格证号:SCXK(黔)2004-0001。灵芝三萜类化合物(GLT,中国科学院地球化学研究所超临界流体技术研究中心提取),健脑胶囊(青岛国风药业股份有限公司)。NO、NOS、T-AOC、MAO试剂盒均购自南京建成生物工程公司。550nm紫外分光光度计,北京光学仪器厂生产。
1.2 方法
1.2.1 试验动物与分组 将24月龄SD大鼠60只随机分为5组,每组12只,雌雄各半,模型组(NS 10mL·kg-1),GLT低(0.33g·kg-1)、高(1.0g·kg-1)剂量组,阳性对照组(JNJN 0.18g·kg-1)及溶媒对照组(金龙鱼食用油10mL·kg-1)。5月龄大鼠12只,为正常对照组(NS 10mL·kg-1)。按上述剂量灌胃给药,每日1次,连续60天。
1.2.2 样本收集及处理[4] 实验结束采用大鼠股动脉取血,离心,取血清置于-80℃超低温冰箱中保存。处死后的大鼠,断头取其脑,称重后按1:9(每克组织加9ml冰生理盐水)加冰生理盐水,并用匀浆器制成10%的匀浆。
1.2.3 检测指标 血清总抗氧化能力(T-AOC)、单胺氧化酶(MAO)活力;脑组织中一氧化氮合酶(NOS)的活性以及一氧化氮(NO)含量。
1.3 数据处理 实验数据均以χ±s表示,采用SPSS12.0统计软件进行分析。采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)进行统计学显著性分析。组间差异显著性采用单因素方差分析中的LSD(Least-significant difference)方法进行多重比较检验,P﹤0.05为有显著性差异。
2 结 果
对自然衰老模型大鼠血清T-AOC、MAO的影响见表1显示,模型组大鼠血清中T-AOC活性降低,MAO活力升高,与正常对照组有显著性差异(P<0.01),GLT灌胃给药后大鼠血清中T-AOC活性升高,MAO活力降低,与模型组有显著性差异(P<0.05或0.01)。
3 讨 论
衰老的自由基学说是1956年Harman D所提出的,该学说认为:机体内时刻产生着自由基,但同时又具有有效的自由基清除系统(如GSH、SOD),二者处于平衡状态,从而使体内自由基维持在正常水平。但随着年龄的增长,这种平衡逐渐被破坏,造成自由基过剩。氧自由基过多会破坏细胞膜及其他重要成份,使蛋白质和酶变性,当自由基引起的损伤积累战胜了机体的修复能力,导致细胞分化状态的改变、甚至丧失,从而导致和加速衰老。
本实验结果证明,灵芝三萜类化合物显著提高老年大鼠血清中T-AOC活性、降低MAO活力并能提高脑组织中NO含量及NOS活性。表明灵芝三萜类化合物可能是通过增强机体清除氧自由基的能力和抗氧化功能,减轻自由基的损伤效应,减少脂质过氧化反应的发生和脂质过氧化产物的生成,维持细胞内环境的稳定,从而起到保护细胞,延缓衰老的作用。
参考文献
[1] 罗俊,林志彬.灵芝三萜类化合物药理作用研究进展[J].药学学报,2002,37(7):574-578.
[2] Lin ZB.The pharmacological effects of Ganoderma lucidum[A].LinZB.Contemporary Studies on Ganoderma lucidum[M].Beijing:Peking Union Medical College and Beijing Medical University United Press,2001:219-220.
[3] 曾祥丽,包海鹰.灵芝三萜类成分与药理学研究进展[J].菌物研究,2004,2(1):68-77.
[4] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2005:1464-1477.
【关键词】 灵芝三萜类化合物;抗衰老;大鼠
文章编号:1004-7484(2013)-10-5961-01
灵芝Ganoderma lucidum Karst为多孔科真菌灵芝及紫芝等的子实体。又名赤芝(《本经》)、灵芝草(《滇南本草》),木灵芝(《杭州药用植物志》)。习惯所称灵芝属中赤芝的子实体部分,其主要成分之一是灵芝三萜类化合物(GLT)[1]。具有抗肿瘤、保肝解毒、降血压、降血脂、改善微循环、抗衰老、抗神经衰弱及治疗糖尿病等作用。
1 资料和方法
1.1 实验材料 SD大鼠:雌雄均有,24月龄及5月龄,由贵阳医学院实验动物中心提供,合格证号:SCXK(黔)2004-0001。灵芝三萜类化合物(GLT,中国科学院地球化学研究所超临界流体技术研究中心提取),健脑胶囊(青岛国风药业股份有限公司)。NO、NOS、T-AOC、MAO试剂盒均购自南京建成生物工程公司。550nm紫外分光光度计,北京光学仪器厂生产。
1.2 方法
1.2.1 试验动物与分组 将24月龄SD大鼠60只随机分为5组,每组12只,雌雄各半,模型组(NS 10mL·kg-1),GLT低(0.33g·kg-1)、高(1.0g·kg-1)剂量组,阳性对照组(JNJN 0.18g·kg-1)及溶媒对照组(金龙鱼食用油10mL·kg-1)。5月龄大鼠12只,为正常对照组(NS 10mL·kg-1)。按上述剂量灌胃给药,每日1次,连续60天。
1.2.2 样本收集及处理[4] 实验结束采用大鼠股动脉取血,离心,取血清置于-80℃超低温冰箱中保存。处死后的大鼠,断头取其脑,称重后按1:9(每克组织加9ml冰生理盐水)加冰生理盐水,并用匀浆器制成10%的匀浆。
1.2.3 检测指标 血清总抗氧化能力(T-AOC)、单胺氧化酶(MAO)活力;脑组织中一氧化氮合酶(NOS)的活性以及一氧化氮(NO)含量。
1.3 数据处理 实验数据均以χ±s表示,采用SPSS12.0统计软件进行分析。采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)进行统计学显著性分析。组间差异显著性采用单因素方差分析中的LSD(Least-significant difference)方法进行多重比较检验,P﹤0.05为有显著性差异。
2 结 果
对自然衰老模型大鼠血清T-AOC、MAO的影响见表1显示,模型组大鼠血清中T-AOC活性降低,MAO活力升高,与正常对照组有显著性差异(P<0.01),GLT灌胃给药后大鼠血清中T-AOC活性升高,MAO活力降低,与模型组有显著性差异(P<0.05或0.01)。
3 讨 论
衰老的自由基学说是1956年Harman D所提出的,该学说认为:机体内时刻产生着自由基,但同时又具有有效的自由基清除系统(如GSH、SOD),二者处于平衡状态,从而使体内自由基维持在正常水平。但随着年龄的增长,这种平衡逐渐被破坏,造成自由基过剩。氧自由基过多会破坏细胞膜及其他重要成份,使蛋白质和酶变性,当自由基引起的损伤积累战胜了机体的修复能力,导致细胞分化状态的改变、甚至丧失,从而导致和加速衰老。
本实验结果证明,灵芝三萜类化合物显著提高老年大鼠血清中T-AOC活性、降低MAO活力并能提高脑组织中NO含量及NOS活性。表明灵芝三萜类化合物可能是通过增强机体清除氧自由基的能力和抗氧化功能,减轻自由基的损伤效应,减少脂质过氧化反应的发生和脂质过氧化产物的生成,维持细胞内环境的稳定,从而起到保护细胞,延缓衰老的作用。
参考文献
[1] 罗俊,林志彬.灵芝三萜类化合物药理作用研究进展[J].药学学报,2002,37(7):574-578.
[2] Lin ZB.The pharmacological effects of Ganoderma lucidum[A].LinZB.Contemporary Studies on Ganoderma lucidum[M].Beijing:Peking Union Medical College and Beijing Medical University United Press,2001:219-220.
[3] 曾祥丽,包海鹰.灵芝三萜类成分与药理学研究进展[J].菌物研究,2004,2(1):68-77.
[4] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2005:1464-1477.