【摘 要】
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[目的]克隆白介素-37(IL-37)基因启动子,构建其荧光素酶报告基因载体,并分析活性。[方法]用PCR方法扩增IL-37基因5’端上游区3个不同长度的启动子片段,分别克隆入荧光素酶报
【机 构】
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广东医学院广东省医学分子诊断重点实验室; 广东医学院医学检验学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(“IL-37调控IL-6介导的炎症信号通路抑制宫颈癌增殖和转移”,No.81302244);广东医学院科研基金项目(“雷公藤内酯醇通过MAPK信号通路诱导IL-37上调表达的研究”,No.Z2014002);广东省大学生创新训练计划项目(“KP-1在雷公藤内酯醇上调IL-37表达中的作用”,No.201510571056)资助
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[目的]克隆白介素-37(IL-37)基因启动子,构建其荧光素酶报告基因载体,并分析活性。[方法]用PCR方法扩增IL-37基因5’端上游区3个不同长度的启动子片段,分别克隆入荧光素酶报告基因载体p GL3,构建IL-37基因启动子荧光素酶报告基因质粒。将所构建的质粒转染HEK-293细胞,通过双荧光素酶报告基因系统分析启动子的转录活性。[结果]754、1 017、2 043 bp等3个IL-37启动子片段正确亚克隆入荧光素酶报告基因载体,重组质粒转染HEK-293细胞后,双荧光素酶活性分析显示1 017 bp的启动子片段具有较强转录活性,约为对照组(空载体p GL3-basic)的10.9倍。[结论]成功克隆IL-37基因启动子,构建了大小为1 017 bp的IL-37基因启动子荧光素酶报告基因载体,为IL-37表达的调控机制的研究提供有效的工具。
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