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目的
探讨miR-195对人胃癌细胞(HGC-27)迁移、侵袭及上皮间质化(EMT)的影响及其作用机理。
方法体外培养HGC-27细胞,采用随机数字表法分为对照组、miR-195阴性对照(NC)组和miR-195模拟物(mimics)组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞miR-195及婆罗双树样基因4(SALL4)mRNA表达情况;显微镜下观察各组细胞形态学变化情况;蛋白印迹分析法检测各组HGC-27细胞SALL4蛋白及EMT相关蛋白上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)、神经性钙粘蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达情况;噻唑蓝(MTT)法检测各组HGC-27细胞存活率变化情况;划痕实验和侵袭实验(Transwell)检测各组HGC-27细胞迁移和侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证miR-195与SALL4的靶向关系。
结果与对照组和miR-195 NC组相比,miR-195 mimics组HGC-27细胞miR-195表达水平[(0.97±0.05)vs(1.01±0.03)vs(2.68±0.07)]、细胞凋亡率[(0.21±0.03)% vs(0.17±0.05)vs(65.14±0.19)%]、E-cadherin蛋白表达水平[(0.23±0.02)vs(0.25±0.03)vs(0.97±0.04)]显著升高(P