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为了建立原核高效表达体系,从自然感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙毒株的肺肿瘤组织中提取基因组DNA,应用PCR技术分别扩增编码囊膜蛋白(env)基因的表面蛋白(surfaceprotein,su)和跨膜蛋白(transmembrane protein,TM)区域基因,通过T—A克隆的方法分别克隆入pGEM—TEasy载体中,然后利用设计的起始密码、终止密码以及相应酶切位点的引物,把env基因的SU区和TM区基因亚克隆到表达载体pGEX-4T~1中,分别构建SU和TM的重组表达质粒,经酶切、PCR及DNA测序鉴定后,