牛传染性鼻气管炎PCR检测方法的建立

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[目的]建立牛传染性鼻气管炎的PCR检测方法。[方法]根据牛传染性鼻气管炎病毒的gB基因序列设计一对引物,进行PCR检测,并对反应条件及反应体系进行优化。[结果]得到与预期大小(362bp)一致的特异性片段。最佳退火温度为58-64℃,Mg^2+最佳浓度为1.6mM,dNTPs为0.36mM,引物为0.2pmol/μL,聚合酶0.8U/100μL。用这对引物扩增IBRV、HCV、PRRSV、PRV,只有IBRV扩增出特异性条带。[结论]该PCR方法的检测灵敏度为2.4ng/100μL,较其他方法敏感。
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