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目的：克隆人钙网蛋白（calreticulin，CRT）并进行原核表达和纯化。方法：采用RT-PCR法从人非小细胞肺腺癌A549细胞总RNA中克隆人钙网蛋白cDNA，构建CRT原核表达质粒（pET-15b／CRT）并转化E．coli的Rossetta菌株。IPTG诱导后，表达蛋白在变性条件下经Ni—NTA树脂亲和层析纯化，然后透析复性。分别用SDS-PAGE和Westem blotting鉴定CRT表达和纯化状态。结果：从A549细胞总RNA中成功获得人CRT cDNA克隆，重组质粒pET-15b／CRT