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目的 体外合成和筛选特异性阻断人滑膜成纤维细胞(RASF)环氧合酶-2(hCOX-2)的小分子干扰RNA(siRNA),同时了解COX-2抑制对炎症因子表达水平的影响.方法 设计4条针对人COX-2 mRNA siRNA(1#～4#siRNA),1条随机序列作为对照.分成A～H组,A组为空白阴性对照,B～F组处理依次为随机siRNA、1#～4#siRNA.应用LipofectAMINE 2000将上述siRNA转染人RASF,各培养孔加入100 nmol/L的佛波酯.转染48 h后,分别应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western Blot检测hCOX-2 mRNA和蛋白表达水平.采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测各组上清液中前列腺素E2(PGE2)和白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、血管内皮生长因子(VEGF)水平.结果 4#siRNA转染的RASF表达hCOX-2 mRNA和蛋白水平明显低于其他siRNA干预组和阴性对照,且其上清液PGE2和IL-1β、I-L6、TNF-α、VEGF水平较其他各组明显下降.结论 4#siRNA能有效抑制COX-2 mRNA表达和COX-2蛋白的合成,且上清液中PGE2和IL-1β、IL-6、TNF-α及VEGF水平最低。