【摘 要】
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应用Pichia酵母表达系统高效表达了传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2基因片段.首先用OLIGO设计1对引物P5、P6,以插入IBDV VP2基因的pUC19为模板,扩增出带有终止密码子的1.5kb片段,
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,东北农业大学动物医学院,延边大学农学院
【基金项目】
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中国-欧盟合作资助项目 (INCO DC :ERBIC18CT980 3 3 0 )
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应用Pichia酵母表达系统高效表达了传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2基因片段.首先用OLIGO设计1对引物P5、P6,以插入IBDV VP2基因的pUC19为模板,扩增出带有终止密码子的1.5kb片段,将此片段正向亚克隆到pPICZA表达载体上,将构建好的载体pPICVP2用SacI内切酶线性化后,转染酵母Pichia pastoris GS115细胞,经PCR鉴定,筛选出50多个重组子.分别用甲醇诱导后,经SDS-PAGE凝胶电泳、琼脂扩散试验、Dot-ELISA检测,得到9个不同程度表达41ku
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