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烟草花药单倍体试管植株Nc89,Nc82,6186,取其完全展开之叶片,切成5mm×5mm大小的叶块,将之接种于补加BA(2mg/L),蔗糖(5%),pH5.8的MS培养基中,然后将其置于23-25℃,12h/d光照的培养间中培养,大致经过14-18天后,在叶外植体边缘部分出现了肉眼可见的绿色小芽,待芽长至约5mm大小时,将其从外植体上分离并置于含1/2MS大量元素,全理MS微量元素,铁盐及有机物