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目的构建并鉴定pAd／CMV／V5-DEST-p16重组腺病毒质粒。方法合成人p16-INK4表达基因，构建pENTR1A-p16质粒。通过LR反应，入口克隆pENTR1A-p16质粒的外源性合成的修饰后的p16cDNA，取代目的质粒pAd／CMV／V5-DEST中的ccdB基因，形成表达克隆pAd／CMV／V5-DEST-p16，测序证实质粒含有目的基因。结果构建了p16重组腺病毒质粒，为研究p16-INK4的作用创造了条件。结论用通路克隆系统构建重组p16腺病毒质粒稳定、可靠、方便。