【摘 要】
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目的 建立微量液体培养法快速鉴别MTB和非结核分枝杆菌(NTM)方法,探讨其临床应用价值.方法 将不同浓度的对硝基苯甲酸(PNB)及噻吩-2-羧酸肼(TCH)和液体培养基加入96孔板中,种
【机 构】
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同济大学附属上海市肺科医院结核病诊疗中心上海市结核病(肺)重点实验室
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目的 建立微量液体培养法快速鉴别MTB和非结核分枝杆菌(NTM)方法,探讨其临床应用价值.方法 将不同浓度的对硝基苯甲酸(PNB)及噻吩-2-羧酸肼(TCH)和液体培养基加入96孔板中,种入待检菌株,37 ℃培养7～10 d观察结果.根据15种分枝杆菌标准株和30株已知MTB临床分离株不同PNB和TCH浓度时生长试验结果,确定PNB和TCH最佳浓度.用建立的微量液体培养法对424株分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定,并与PCR鉴定及测序鉴定结果进行比较.结果 微量液体培养法中PNB浓度200μg/ml时可有效区分MTB和NTM标准株;TCH浓度0.5 μg/ml时可有效区分结核分枝杆菌与牛结核分枝杆菌标准株.本法鉴定424株分枝杆菌临床分离株,以PCR法鉴定结果为标准,可鉴定出313株结核分枝杆菌复合群菌株中306株和全部NTM菌株,鉴定结核分枝杆菌复合群灵敏度为97.8%(306/313),特异度为100.0%(107/107);鉴定NTM的灵敏度为100.0%(107/107),特异度为96.5%(306/317);可鉴定出全部的MTB菌株,鉴定MTB的灵敏度可以达到100.0%(305/305),特异度尚待研究.结论 微量液体培养法可以在7～10 d内对分枝杆菌菌种进行快速鉴定,结果准确度高,操作简便,成本低廉,符合临床快速诊断的需要,适合在我国各级医疗机构推广使用.
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