支气管肺发育不良新生大鼠肺组织Occludin的表达及其对肺上皮通透性的影响

来源 :中华实用儿科临床杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hnzzzc
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目的 研究高体积分数氧(高氧)致新生大鼠支气管肺发育不良(BPD)早期肺组织Occludin蛋白及mRNA的动态变化,以及其对肺上皮通透性的影响.方法 新生Wistar大鼠160只,依据吸氧体积分数(FiO2)随机分为高氧组(FiO2 =900 mL/L)和空气组(FiO2 =210 mL/L),每组80只.分别于建立模型后l、3、5、7d处死大鼠后取肺组织.检测支气管肺泡灌洗液(BALF)与血清异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FD4)比值;采用免疫荧光染色及Western blot技术观察Occludin蛋白的分布和表达;采用反转录-PCR技术检测Occlu-din mRNA的表达.结果 空气组与高氧组1 d BALF与血清FD4比值比较差异无统计学意义(1.533±0.122比1.575±0.140,P>0.05);与空气组比较,高氧组3 d BALF与血清FD4比值有所增加(1.365±0.159比1.615±0.196,P<0.05),5d、7d显著增加(1.245±0.152比3.211 ±0.799;1.178 ±0.594比5.150±0.967,P均<0.01).免疫荧光结果显示,空气组7d肺泡上皮细胞边缘Occludin蛋白呈现连续线性分布,高氧组7d表达不连续,荧光强度较弱;空气组与高氧组1 d Occludin mRNA表达比较差异无统计学意义(2.15±0.33比2.23±0.39,P>0.05);与空气组比较,高氧组3d、5 d Occludin mRNA减少(2.46 ±0.27比2.00 ±0.19,2.62 ±0.28比2.15 ±0.20,P均<0.05),7d减少最明显(3.08 ±0.43比2.01 ±0.34,P<0.01);1d、3d空气组与高氧组Occludin蛋白表达比较差异无统计学意义(1.00±0.05比1.05 ±0.03,1.24±0.06比1.17 ±0.04,P均>0.05),与空气组比较,高氧组5d减少,差异有统计学意义(1.03±0.04比0.93 ±0.05,P<0.05),7d减少最明显(0.96±0.14比0.65 ±0.07,P<0.01);高氧组Occludin蛋白的表达与肺上皮通透性呈明显负相关(r=-0.755,P<0.01).结论 肺组织Occludin表达下调,可能导致肺上皮通透性增加,进而参与高氧致BPD早期肺水肿的发生、发展过程.
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