【摘 要】
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目的探讨表达人乳头状瘤病毒6b型(HPV6b)L1-E7嵌合蛋白的减毒沙门菌诱导小鼠粘膜及系统免疫反应的可行性. 方法对重组减毒沙门菌S.BRD509/pTETnir15-6bL1E7体外厌氧诱导其表达,Western blot方法鉴定表达的 L1-E7蛋白.此重组沙门菌经滴鼻和口服联合粘膜免疫BALB/c小鼠,采用ELISA方法及足垫肿胀试验分别检测免疫小鼠血清及阴道冲洗液中特异性抗体和DTH反
【机 构】
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250012,济南,山东大学医学院微生物学教研室
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目的探讨表达人乳头状瘤病毒6b型(HPV6b)L1-E7嵌合蛋白的减毒沙门菌诱导小鼠粘膜及系统免疫反应的可行性. 方法对重组减毒沙门菌S.BRD509/pTETnir15-6bL1E7体外厌氧诱导其表达,Western blot方法鉴定表达的 L1-E7蛋白.此重组沙门菌经滴鼻和口服联合粘膜免疫BALB/c小鼠,采用ELISA方法及足垫肿胀试验分别检测免疫小鼠血清及阴道冲洗液中特异性抗体和DTH反应. 结果 Western blot分析显示,重组沙门菌在预计相对分子质量(Mr)56×103处有特异染色带,提示此重组沙门菌能表达特异的HPV6bL1-E7蛋白.ELISA检测结果表明实验组小鼠阴道冲洗液中HPV6b L1特异性sIgA显著升高,和对照组比较两者差异有显著性(P＜0.01),但小鼠血清中HPV6b L1 IgG抗体无明显变化,实验组和对照组两者差异无显著性.DTH 结果显示:与对照组比较,实验组小鼠接受HPV6b L1-E7抗原刺激后产生明显阳性反应,提示重组沙门菌免疫小鼠产生了针对HPV6b L1-E7抗原的特异性细胞免疫反应. 结论构建的重组减毒沙门菌S.BRD509/pTETnir15-6bL1E7可激发有效的粘膜免疫及细胞免疫反应,为进一步研制新型HPV粘膜疫苗奠定了实验基础.
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