【摘 要】
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目的在大肠杆菌中高效表达ROP1抗原.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株cDNA文库中扩增得到编码ROP1的基因,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX-5x-3,然后在大肠杆菌BL21中
【机 构】
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苏州医学院寄生虫学教研室,复旦大学生命科学院生物化学系
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目的在大肠杆菌中高效表达ROP1抗原.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株cDNA文库中扩增得到编码ROP1的基因,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX-5x-3,然后在大肠杆菌BL21中进行表达,用亲和层析柱纯化表达产物, 并用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定.结果 (1)在我们比较的1 249 个碱基中,我们得到的ROP1基因在Ossorio报道的基因的447位与448 位之间有一96bp的插入片段,另有14个碱基不同,造成3个氨基酸的改变,两基因之间有91.19%
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