拟南芥中 Fibrillarin 基因的克隆.表达.纯化及与 ak6 蛋白相互作用研究

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[目的]研究拟南芥中Fibdllarin基因的克隆、表达及纯化,并探索其与ak6蛋白的相互作用。[方法]利用pGEX-6P-1与Fibrilla—r流基因构建重组表达质粒,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,运用同样方法构建PET-28a—ak6原核表达质粒,获得His—ak6融合蛋白,并运用体外pulldown技术验证二者的相互作用。f结果l在温度为37℃、诱导时间为16~20h、IPTG浓度为0.5mmol/L时,fibrillarin蛋白的纯化浓度最高。试验成功获得了符合标准的
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