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摘要：以混合细菌感染建立大鼠细菌性阴道炎模型，以高、中、低剂量荞麦黄酮复合物为受试药物，以洁尔阴洗液作为对照，选择大鼠一般状态（体重）和阴道局部外观、阴道分泌物、细菌及坏死的脱落细胞镜检及阴道组织的病理变化作为观察指标。结果显示：荞麦黄酮复合物能有效地改善外阴肿胀和分泌物增多的现象，明显抑制大鼠阴道组织病理学损伤，与模型组比较病理积分有明显差异。表明荞麦黄酮复合物对大鼠细菌性阴道炎有较好疗效，具有开发生产的潜力。
关键词：荞麦黄酮复合物；金黄色葡萄球菌；绿脓杆菌；大肠杆菌；阴道炎
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1001-828X（2014）08-00-01
一、材料
SPF级SD大鼠，♀，无孕（天津市山川红试验动物科技有限公司）。荞麦黄酮复合物：采用正交试验法以水加分离剂（壳聚糖）提取荞麦黄酮复合物（成熟技术），配伍葛根、天花粉、麦冬、玄参和麻仁的水提物制成；阳性对照药洁尔阴洗液（四川恩成制药有限公司）。金黄葡萄球菌，绿脓杆菌，大肠杆菌临床新分离菌株，由开滦医院检验科提供。
二、试验方法
1.模型制备。将3种菌株复苏、传代，用无菌营养肉汤将每种菌配制成各自浓度为1.0x109个/mL的菌液，之后将三种菌液按1：1：1的比例混合成感染菌液。用微量加样器缓慢插入大鼠阴道约1 cm～1.5 cm，注入混合细菌液为50ul，1次/d，连续6天。模型鉴定成功后，成摸大鼠随机分组。
2.分组与给药。雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药物洁尔阴洗液组以及荞麦黄酮复合物高剂量组（1.35g/kg/d）、中剂量组（0.27g/kg/d）、低剂量组（0.135g/kg/d），共6组n=12。除正常对照组和模型组大鼠每天阴道灌注0.5ml/100g生理盐水， 其余各给药组每天阴道灌注相应药物1次， 0.5ml/100g，连续7d。
三、试验观察指标
1.一般状态。试验期间动态观察各组大鼠精神状态、活动、毛色、饮食、饮水、体重变化及大小便等有无改变。
2.外阴及阴道分泌物观察。于给药第0、5、8天观察各组大鼠外阴红肿及阴道分泌物情况。
3.阴道灌洗液检测。（1）镜下观察活动细菌量：各组大鼠均于给药第0、5、8天用50ul PBS灌洗阴道，置灌洗液于载玻片，即刻于40倍倒置显微镜下观察活动细菌量。 （2）镜检白细胞及阴道脱落细胞：各组大鼠均于给药0、5、8天取PBS阴道灌洗液于载玻片上，40倍显微镜下镜检白细胞及阴道脱落上皮细胞。（3）G染色镜检细菌：分别于给药0、5、8天取PBS阴道灌洗液涂片革兰氏染色镜检。
4.阴道组织病理学检查。于给药8天阴道灌洗后，脱臼处死大鼠，随机取6只大鼠阴道组织及其周围组织作常规石蜡包埋，HE染色，镜下观察病理变化。
5.统计分析方法。采用SPSS16.00统计软件处理数据。计量资料以x±s表示。统计结果分别采用秩和检验和Ridit检验进行处理。
四、结果
1.各组大鼠一般状态。各组大鼠精神状态、活动、毛色、饮食、饮水、体重变化及大小便均未见明显改变，各组间无明显差异。
2.大鼠外阴肉眼观察。正常对照组大鼠阴道外观无充血、红肿，无脓性分泌物；模型对照组大鼠接种细菌第3天开始见阴道外观充血、红肿，随时间逐渐加重，并有大量脓性分泌物。各治疗组随着给药天数增加外阴红肿明显消失，分泌物明显减少，给药第8天多数大鼠阴道外观于正常对照组大鼠相近。
3.各组大鼠阴道灌洗液直接镜检混合菌量。给药后第5、8天各组大鼠阴道灌洗液镜检。显示：荞麦黄酮复合物随着剂量的增加及药物应用的时间延长，细菌检出量逐渐减少，细菌转阴率增加，高剂量组作用更明显，与阳性对照药洁尔阴相近；而模型对照组组无转阴。
4.各组大鼠阴道灌洗液G染色镜检细菌量。给药后第5、8天各组大鼠阴道灌洗液涂片G染色镜检细菌。表明：荞麦黄酮复合物随着剂量的增加及药物应用的时间延长，细菌检出量逐渐减少，同时细菌转阴率增加，高剂量组作用更明显，与阳性对照药洁尔阴相近；而模型对照组无转阴。
5.阴道灌洗液脱落上皮细胞检查结果。给药后第5、8天各组大鼠阴道灌洗液脱落上皮细胞直接镜检。结果：荞麦黄酮复合物随着剂量和应用时间的增加，脱落上皮细胞检出率逐渐减少，高剂量作用更明显，与洁尔阴相近。
6. 阴道组织病理检查结果。模型对照组大鼠病理组织学观察为中度和重度充血、水肿，有大量炎细胞浸润。荞麦黄酮复合物高剂量组大鼠病理组织学观察为轻度充血、水肿，少量炎细胞浸润，其治疗效果与阳性对照药物组洁尔阴洗液相近。
五、结论
荞麦黄酮复合物对混合细菌感染所致大鼠阴道炎有一定的疗效，中、高剂量作用与阳性对照药物洁尔阴治疗效果相近。
荞麦花叶总黄酮是经过水加分离剂提取的荞麦黄酮复合物的主要药用成分，其来源于内蒙古库伦旗无果的霜冻后荞麦花、叶，来源丰富，经济实惠，提取工艺简单成熟，适合工业化生产，就有巨大的开发产业化的价值。
参考文献：
[1]郭建生，秦玮，伍参荣等.妇炎乐胶囊对细菌性阴道炎模型小鼠的治疗作用[J]医药导报，2007，26（6）：604-605.
[2]张芳侠， 张丽军， 张小燕.妇舒乐栓抗家兔细菌性阴道炎试验[J]西北药学杂志，2002，17（5）：209-211.
关键词：荞麦黄酮复合物；金黄色葡萄球菌；绿脓杆菌；大肠杆菌；阴道炎
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1001-828X（2014）08-00-01
一、材料
SPF级SD大鼠，♀，无孕（天津市山川红试验动物科技有限公司）。荞麦黄酮复合物：采用正交试验法以水加分离剂（壳聚糖）提取荞麦黄酮复合物（成熟技术），配伍葛根、天花粉、麦冬、玄参和麻仁的水提物制成；阳性对照药洁尔阴洗液（四川恩成制药有限公司）。金黄葡萄球菌，绿脓杆菌，大肠杆菌临床新分离菌株，由开滦医院检验科提供。
二、试验方法
1.模型制备。将3种菌株复苏、传代，用无菌营养肉汤将每种菌配制成各自浓度为1.0x109个/mL的菌液，之后将三种菌液按1：1：1的比例混合成感染菌液。用微量加样器缓慢插入大鼠阴道约1 cm～1.5 cm，注入混合细菌液为50ul，1次/d，连续6天。模型鉴定成功后，成摸大鼠随机分组。
2.分组与给药。雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药物洁尔阴洗液组以及荞麦黄酮复合物高剂量组（1.35g/kg/d）、中剂量组（0.27g/kg/d）、低剂量组（0.135g/kg/d），共6组n=12。除正常对照组和模型组大鼠每天阴道灌注0.5ml/100g生理盐水， 其余各给药组每天阴道灌注相应药物1次， 0.5ml/100g，连续7d。
三、试验观察指标
1.一般状态。试验期间动态观察各组大鼠精神状态、活动、毛色、饮食、饮水、体重变化及大小便等有无改变。
2.外阴及阴道分泌物观察。于给药第0、5、8天观察各组大鼠外阴红肿及阴道分泌物情况。
3.阴道灌洗液检测。（1）镜下观察活动细菌量：各组大鼠均于给药第0、5、8天用50ul PBS灌洗阴道，置灌洗液于载玻片，即刻于40倍倒置显微镜下观察活动细菌量。 （2）镜检白细胞及阴道脱落细胞：各组大鼠均于给药0、5、8天取PBS阴道灌洗液于载玻片上，40倍显微镜下镜检白细胞及阴道脱落上皮细胞。（3）G染色镜检细菌：分别于给药0、5、8天取PBS阴道灌洗液涂片革兰氏染色镜检。
4.阴道组织病理学检查。于给药8天阴道灌洗后，脱臼处死大鼠，随机取6只大鼠阴道组织及其周围组织作常规石蜡包埋，HE染色，镜下观察病理变化。
5.统计分析方法。采用SPSS16.00统计软件处理数据。计量资料以x±s表示。统计结果分别采用秩和检验和Ridit检验进行处理。
四、结果
1.各组大鼠一般状态。各组大鼠精神状态、活动、毛色、饮食、饮水、体重变化及大小便均未见明显改变，各组间无明显差异。
2.大鼠外阴肉眼观察。正常对照组大鼠阴道外观无充血、红肿，无脓性分泌物；模型对照组大鼠接种细菌第3天开始见阴道外观充血、红肿，随时间逐渐加重，并有大量脓性分泌物。各治疗组随着给药天数增加外阴红肿明显消失，分泌物明显减少，给药第8天多数大鼠阴道外观于正常对照组大鼠相近。
3.各组大鼠阴道灌洗液直接镜检混合菌量。给药后第5、8天各组大鼠阴道灌洗液镜检。显示：荞麦黄酮复合物随着剂量的增加及药物应用的时间延长，细菌检出量逐渐减少，细菌转阴率增加，高剂量组作用更明显，与阳性对照药洁尔阴相近；而模型对照组组无转阴。
4.各组大鼠阴道灌洗液G染色镜检细菌量。给药后第5、8天各组大鼠阴道灌洗液涂片G染色镜检细菌。表明：荞麦黄酮复合物随着剂量的增加及药物应用的时间延长，细菌检出量逐渐减少，同时细菌转阴率增加，高剂量组作用更明显，与阳性对照药洁尔阴相近；而模型对照组无转阴。
5.阴道灌洗液脱落上皮细胞检查结果。给药后第5、8天各组大鼠阴道灌洗液脱落上皮细胞直接镜检。结果：荞麦黄酮复合物随着剂量和应用时间的增加，脱落上皮细胞检出率逐渐减少，高剂量作用更明显，与洁尔阴相近。
6. 阴道组织病理检查结果。模型对照组大鼠病理组织学观察为中度和重度充血、水肿，有大量炎细胞浸润。荞麦黄酮复合物高剂量组大鼠病理组织学观察为轻度充血、水肿，少量炎细胞浸润，其治疗效果与阳性对照药物组洁尔阴洗液相近。
五、结论
荞麦黄酮复合物对混合细菌感染所致大鼠阴道炎有一定的疗效，中、高剂量作用与阳性对照药物洁尔阴治疗效果相近。
荞麦花叶总黄酮是经过水加分离剂提取的荞麦黄酮复合物的主要药用成分，其来源于内蒙古库伦旗无果的霜冻后荞麦花、叶，来源丰富，经济实惠，提取工艺简单成熟，适合工业化生产，就有巨大的开发产业化的价值。
参考文献：
[1]郭建生，秦玮，伍参荣等.妇炎乐胶囊对细菌性阴道炎模型小鼠的治疗作用[J]医药导报，2007，26（6）：604-605.
[2]张芳侠， 张丽军， 张小燕.妇舒乐栓抗家兔细菌性阴道炎试验[J]西北药学杂志，2002，17（5）：209-211.