海洋金属蛋白酶MP仿生亲和材料纯化条件的优化

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目的:建立一种高效的海洋金属蛋白酶MP仿生亲和纯化方法。方法:采用硼酸仿生亲和材料,利用单因素实验,P1ackett—Burman实验设计、Box—Behnken实验等响应面优化法,对纯化条件进行优化,利用SDS—PAGE及HPLC分析纯化后样品纯度。结果:利用单因素法和响应面法对纯化条件进行优化和分析,获得硼酸琼脂糖凝胶亲和柱的最佳纯化条件为:粗酶液浓度在100mg/mL,上样缓冲液为pH8.6的甘氨酸一氢氧化钠,上样速度lmL/min,洗脱缓冲液为pH5.2的磷酸氢二钠一柠檬酸,洗脱速度2mL/min
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