【摘 要】
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目的 从microRNA(miR)组学角度探讨坐骨神经预损伤促进脊髓后索损伤修复的机制,以期寻找关键治疗靶点. 方法 健康雌性Wistar大鼠48只,按随机数字表法分为坐骨神经预损伤+脊髓
【机 构】
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天津医科大学总医院骨科,解放军第二六六医院骨一科,首都医科大学附属潞河医院骨科,承德医学院附属医院儿内科,天津医科大学第二附属医院骨科,解放军第二六六医院医院普外科
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目的 从microRNA(miR)组学角度探讨坐骨神经预损伤促进脊髓后索损伤修复的机制,以期寻找关键治疗靶点. 方法 健康雌性Wistar大鼠48只,按随机数字表法分为坐骨神经预损伤+脊髓后索损伤组(15只)、单纯脊髓后索损伤组(15只)、单纯坐骨神经损伤组(15只)和对照组(3只).在脊髓后索损伤前7d切断大鼠双侧坐骨神经,脊髓后索损伤后4h、1d、3d、7d每组取3只大鼠处死并取与双侧坐骨神经对应的背根神经节,miR芯片分析miR表达谱;实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-182、cAMP应答元件结合蛋白(CREB) mRNA的表达;Western blotting、EHSA分别检测CREB、p-CREB蛋白的表达和cAMP含量;脊髓后索损伤后14 d取损伤段脊髓,HE染色,免疫组化染色检测脊髓后索神经丝蛋白NF-200的表达. 结果 与对照组相比,坐骨神经损伤+脊髓后索损伤组、单纯脊髓后索损伤组大鼠损伤后不同时间共有681个miRNA表达发生变化.与单纯脊髓后索损伤组比较,坐骨神经损伤+脊髓后索损伤组损伤后3d和7 d miR-182表达下调;与对照组相比,单纯坐骨神经损伤组大鼠背根神经节miR-182、坐骨神经损伤+脊髓后索损伤组背根神经节CREBmRNA的表达均无明显变化,差异无统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,坐骨神经损伤+脊髓后索损伤组大鼠损伤后3d、7d背根神经节CREB和p-CREB蛋白表达,4h、1d、3d、7d背根神经节cAMP的含量均增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫组化染色检测显示坐骨神经损伤+脊髓后索损伤组脊髓后索损伤中心尾端NF200表达比单纯脊髓后索损伤组增加,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 坐骨神经预损伤促进脊髓后索损伤的修复,机制与背根神经节中miR-182下调、cAMP上调,从而导致磷酸化CREB蛋白增加有关.
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