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目的
了解儿童幽门螺杆菌(Helicobacter pylor,Hp)对克拉霉素的耐药情况,探讨Hp对克拉霉素耐药性与23S rRNA基因突变的关系。
方法108例胃黏膜标本均取自2002年10月~2004年1月在浙江大学医学院附属儿童医院进行胃镜检查的患儿,经分离培养鉴定为Hp菌株后,分别采用E-test法和琼脂稀释法检测克拉霉素的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),确定Hp菌株对克拉霉素的耐药性。提取所有108株Hp基因组DNA进行PCR扩增,用限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism, RFLP)检测克拉霉素耐药菌株的点突变。
结果Hp菌株对克拉霉素耐药率为14.8%(16/108)。16株耐药菌株23S rRNA V功能区PCR扩增片段RFLP分析,13株被BsaI酶切,提示2144位点存在A→G点突变,3株被BbsI酶切,提示2143位点存在A→G点突变,所有敏感菌株均不能被BsaI和BbsI酶切,提示无23S rRNA基因相应位点的点突变。同时本研究中并未发现突变形式与耐药程度的相关性。
结论儿童Hp感染对克拉霉素耐药率较高;23S rRNA基因点突变是Hp对克拉霉素耐药的重要因素。耐药菌株存在A2144G和A2143G突变,以前者为主。