重组HBsAg真核表达载体的构建及其稳定转染H22细胞的筛选

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q3324079
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目的构建乙肝表面抗原(HBsAg)基因(678bp)的真核表达质粒(pcDNA3-HBsAg),转染小鼠乳肝癌细胞(H22),获得其稳定表达细胞株(H22/HBsAg)。方法用PCR方法从含乙肝病毒(HBV)基因的PUC18-HBV质粒上扩增HBsAg基因序列;经酶切、连接构建pcDNA3-HBsAg;利用改良的阳离子脂质体介导法将其转染入H22细胞,经G418筛选获得阳性克隆细胞株,用RT-PCR法检测阳性细胞株的HBsAg mRNA。结果成功构建了重组HBsAg真核表达载体,并获得了稳定表达HBsAg
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