【摘 要】
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采用可导致肢体畸形的已知致畸物N-甲基-N′-硝基-N-甲基亚硝基胍(MNNG)作为受试物,诱发小鼠肢体的异常发育表型,然后用抑制消减杂交技术(SSH)筛选该模型畸形肢体和相应正常器官的
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采用可导致肢体畸形的已知致畸物N-甲基-N′-硝基-N-甲基亚硝基胍(MNNG)作为受试物,诱发小鼠肢体的异常发育表型,然后用抑制消减杂交技术(SSH)筛选该模型畸形肢体和相应正常器官的差异表达基因。结果发现,小鼠妊娠第12天一次腹腔注射给予40 mg/kg MNNG可诱发的胎鼠肢体畸形,发生率高。肢体畸形以活胎计的发生率为33.7%,以窝计为81.8%,肢体畸形占畸胎鼠的构成比为100%,且以短指(趾)和缺指(趾)最为常见,其次还有多指(趾)和短肢等。畸形发生的部位存在左右及前后不对称性,四肢畸形的发生率和畸形严重程度依次为左后>左前>右后>右前。特别是发现并证实大体形态所见短肢是径腓骨缺失所致;肋骨的异常发育也存在明显的左右不对称性,这些发现尚未见国内外有报道。应用SSH技术和点杂交等技术对孕期第18天的MNNG诱发的小鼠胚胎畸形肢体和相应对照组正常肢体的差异表达基因进行筛选,共得到25个差异片断,对其中的12个进行测序。GeneBank查询比对之后发现,1条为已知基因,即小鼠基因Pex3; 另外3条分别与小鼠melanoma X-actin(Actx) mRNA、小鼠端粒酶结合蛋白p23和人胶原I型alphal基因同源(但blastx/nr查询结果不支持该结论),视为可能已知基因;其余6条序列分别
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